欸踢屁 ATP
@minckang
Fri, Oct 30, 2020 3:31 PM
Antibody-producing yeast vanquishes deadly gut infec...
沒有人
@MEB
Fri, Oct 30, 2020 4:21 PM
叫酵母菌去做抗體嘛?!
LOL 喵同學
@Florathecat
Fri, Oct 30, 2020 10:30 PM
其實以前就很多人在用Pichia表現抗體了,不過yeast glycosylation不一樣,會有immunogenicity 的問題。是說即使是吃的,腸胃道裏也會有IgA吧?
欸踢屁 ATP
@minckang
Sat, Oct 31, 2020 6:09 PM
Thermo 的 PichiaPink 說是可表現 12g/L
PichiaPink™ Yeast Expression Systems | Thermo Fisher...
欸踢屁 ATP
@minckang
Sat, Oct 31, 2020 6:10 PM
很久以前找資料的時候,有看到有人基改酵母去 humanize yeast glycosylation。
LOL 喵同學
@Florathecat
Sun, Nov 1, 2020 1:40 AM
我知道Merck有弄過一陣子, 後來沒有很成功。有一家叫DNA2.0的公司也有在做(或是和某家公司合作過在弄), 我買過他們一個protease deficient strain, 和我本來在用的wildtype沒什麼不同, 後來就沒繼續下去。
LOL 喵同學
@Florathecat
Sun, Nov 1, 2020 1:43 AM
Pichia表現不是大好就是大壞, 而且常常有很嚴重的N/C-ter degradation, 我做了一陣子覺得沒有像宣傳的說的那麼容易, 真的要做好還是要花不少時間。如果CHO cells已經有一個不錯的platform, 那我寧願用CHO, 貴就給他貴。
欸踢屁 ATP
@minckang
Mon, Nov 2, 2020 2:51 AM
我們之前都是試 small scale, 沒太大問題,不過印象中 yield 和 E. coli 差不多。(至少不是讓我驚艷的那個量)
LOL 喵同學
@Florathecat
Mon, Nov 2, 2020 11:56 AM
我和E. coli沒什麼緣份,幾乎都是用yeast
欸踢屁 ATP
@minckang
Mon, Nov 2, 2020 4:33 PM
我進這家公司之前,E. coli 只是用來 cloning 的工具而已。
LOL 喵同學
@Florathecat
Mon, Nov 2, 2020 5:10 PM
我的經驗: E. coli-cloning-> E. coli expression (失敗)-> cloning -> yeast expression ,換tag,codon optimization,換expression strain,無限迴圈。
LOL 喵同學
@Florathecat
Mon, Nov 2, 2020 5:12 PM
其實如果insoluble body就好的話 E. coli 還是不錯的,不過我都要有活性,所以做不下去。
欸踢屁 ATP
@minckang
Wed, Nov 4, 2020 4:46 PM
我們也有 insoluble 的問題,後來換成 shuffle 後大概有 50% 的 insoluble proteins 就好了。
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PichiaPink™ Yeast Expression Systems | Thermo Fisher...