need help
why我的DNA電泳上半部這麼亮

鹽離子濃度過高或者分佈不均？

還有一個說超負荷熟了
這個我沒經驗

egg346: 鹽離子濃度過高，所以可能是TAE buffer的問題嗎？
熟 那我之後試用比較低伏特跑看看，感謝蛋大！

你是跑前染還是跑後染？還有是用什麼染劑？

還有一個說你緩衝液放太久了
可能隔夜了 靠北一堆鬼跑來幹保全

mink2948: 跑前染，用的是這個Safeview classic

就我最爛我都看不懂

不覺得是egg說的那些原因
含etbr的染劑不建議跑前染因為它帶正電
可以參考下面的討論
https://www.researchgate.net/...

看來幹保全不是沒原因的
噗主快點實驗我要去笑他們

50x緩衝液其實可以放很久，只要是用之前稀釋就行
濃度過高或分布不均的話你的band會長得更醜
然後你電壓調低沒幫助，只是會讓解析度變差

另外我會覺得你染劑放太多了
背景很雜
如果你是照protocol作
可以再調更稀一點

egg346: 這個緩衝液是真的重複用很多次ㄌ
mink2948: Safeview應該不是etbr，雖然我也不知道他到底是什麼 我找找實驗室有沒有跑後染的染劑
另外這個TAE不只是放很久，是我們每次實驗後會回收使用(電泳槽裡的，製膠用的是新的TAE)，這部分會不會影響？

通常染劑都是帶正電（因為dna帶負電，這樣才能卡進去）所以我通常都是跑後染
tae要回收重複用ok，但是要槽裡和製膠用同一個來源比較好（都用回收的或都用新的）

但其實我以前buffer都不會重複用的啦
省buffer的小錢，搞不好會造成後續debug花更多時間和錢，不划算

mink2948: 我之後配新的TAE再跑一次試試，也挖挖看跑後染的染劑
真D感謝兩位